大鼠白蛋白(ALB)ELISA試劑盒:實(shí)驗(yàn)免疫方案
更新時(shí)間:2015-08-20 點(diǎn)擊次數(shù):1130次1、抗原: 蛋白質(zhì)、多肽、細(xì)胞器、細(xì)胞、組織等。
2、免疫方式:皮下注射、腹腔注射、靜脈注射、肌肉注射等。
3、不同動(dòng)物免疫所需抗原量(以蛋白免疫為例)
>18-20kDa <18-20kDa
動(dòng)物 抗原量 *抗原量 抗原量 *抗原量
兔子 20-200 100 50-400 200
小鼠 2-40 15 4-60 40
大鼠 10-50 30 20-150 50
綿羊 100-1000 200 200-1000 400
母雞 20-200 100 50-400 200
單位:微克
4、免疫方案(以免疫兔子為例):
天數(shù) 0 14 28 38 56 66 87
注射 x x x x
采血 2ml 2ml 2+20ml 2+50-70ml
5、注意:
1)*次免疫用*佐劑與免疫原混合,以后加強(qiáng)免疫用不*佐劑與免疫原混合,采取多點(diǎn),時(shí)間間隔式免疫法。
2) 如果用細(xì)胞免疫兔子,那么每次免疫所需細(xì)胞量為2-3 x 107 cells。
3) 在連續(xù)免疫完三次后,需要少量取血進(jìn)行ELISA檢測,檢測所免疫動(dòng)物的抗體滴度,一般滴度能達(dá)到1:10,000-50,000。在處死所免疫的動(dòng)物前一周應(yīng)加強(qiáng)一次免疫。
4) 如果用小鼠免疫,可以尾靜脈小量采血(大約50μl),zui后取眼球大量采血(大約500-1000μl);如果用兔子免疫,可以耳緣靜脈小量取血(大約2mL),zui后心臟大量取血(50-100mL)
5) 按血清制備的標(biāo)準(zhǔn)方法將血清分離,并且分裝成小份,儲(chǔ)藏在-80oC。