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雞白細胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒產品簡介!

更新時間:2017-11-24   點擊次數:1125次

雞白細胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒產品簡介!

ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。自上世紀70年代初問世 以來,發展十分迅速,目前已被廣泛用 于生物學和醫學科學的許多領域。
ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。

檢測目的:

本試劑盒用于測定血清、血漿及相關液體樣本中白細胞介素2(IL-2)含量。

雞白細胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒產品簡介!

實驗原理:

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中雞白細胞介素2(IL-2)水平。用純化 的雞白細胞介素2(IL-2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中 依次加入白細胞介素2(IL-2),再與 HRP 標記的白細胞介素2(IL-2)抗 體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細胞介素2(IL-2)呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標 準曲線計算樣品中雞白細胞介素2(IL-2)濃度。

操作步驟:

  • 標準提供戶可管中行稀 釋。

180ng/L

5 號標準品

150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液

90ng/L

4 號標準品

150µl  5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液

45ng/L

3 號標準品

150µl  4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液

22.5ng/L

2 號標準品

150µl  3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液

11.25ng/L

1 號標準品

150µl  2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液

 

  • 加樣白對孔、待測被板 50µl測樣 40µl, 然后 10µl樣品zui 5 加樣,盡 量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
  • 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
  • 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
  • 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。
  • 加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。
  • 溫育:操作同 3
  • 洗滌:操作同 5
  • 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.
  • 終止終止 50µl,終轉黃
  • 測定調450nm 波長依OD  加終止 液后 15 分鐘以內進行。
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  • 保存條件及有效期:
  • 12-8

    2.有效期:6 個月

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