- 簡介:
- (matrix metalloproteinase, MMP)以無活性的酶原形式分泌,活化后能夠降解細胞外基質的膠原蛋白,又稱膠原酶。通過影響細胞外基質,膠原酶參與胚胎發育、形態發生、組織重塑等過程,并參與炎癥、腫瘤、、神經等許多疾病過程。血漿與組織中的MMP-2、MMP-9參與各種生理與病理過程,其在診斷和治療中的意義日益受到重視。
- 檢測原理:
- (Zymography)檢測MMP-2、MMP-9 活性。Zymography 是一種廣為使用的、基于SDS-PAGE 電泳和反相凝膠染色的蛋白酶檢測方法,其靈敏度可達1 nM,高于ELISA方法,其基本原理和程序是:制備加有膠原酶底物的SDS-PAGE 凝膠,含蛋白酶的樣品在此凝膠中進行電泳,電泳結束后取出凝膠與酶反應Buffer 孵育,凝膠染色與脫色。凝膠中由于含底物蛋白而被深染,形成深色背景,但在有蛋白酶條帶的位置,蛋白酶將降解凝膠中的底物蛋白,因而不被染色而形成透亮區域,從而能同時指示MMP-2、MMP-9 的大小位置(酶譜)及活性。本試劑盒提供MMP-2、MMP-9 特異蛋白底物及酶學反應緩沖液,可檢測少至0.1~0.5 μl 血液中的MMP-2、MMP-9 酶譜及活性,檢測靈敏度~1nM。試劑盒可進行50次標準小膠檢測,如果小膠加樣孔為10~15個,則總計可檢測500~750個樣品。
- 檢測目的:
- 測MMP-2、MMP-9 酶譜及活性(Detect MMP2 and MMP9 as low as 1nM)。
4. 試劑盒組成與儲存: A. 2 × SDS-PAGE non-reducing buffer 1.5 ml , −20 ºC; B. 10 × Substrate G, 50 ml, −20 ºC; C. 10 × Buffer A, 50 ml, 4 ºC, 使用時用蒸餾水稀釋; D. 10 × Buffer B, 50 ml, 4 ºC, 使用時用蒸餾水稀釋; E. SDS-PAGE 凝膠蛋白質考馬斯亮藍染色液, 4 ºC。 |