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WB實(shí)驗(yàn)代測(cè) 檢測(cè)服務(wù)

  • 型   號(hào):
  • 參考價(jià):0~0

WB實(shí)驗(yàn)代測(cè)
服務(wù)項(xiàng)目:WB檢測(cè)/抗體費(fèi)用
樣本運(yùn)輸要求:
1、組織新鮮標(biāo)本,100mg以上(綠豆大小);
2、細(xì)胞數(shù)106離心收集沉淀,綠豆大小。
3、全程干冰運(yùn)輸。
信帆生物提供各類(lèi)實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù),更多服務(wù)項(xiàng)目歡迎致電咨詢(xún),我們將竭誠(chéng)為您服務(wù)!

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WB實(shí)驗(yàn)代測(cè)

免疫印跡(immunoblotting)又稱(chēng)蛋白質(zhì)印跡(Western blotting),它是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測(cè)復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測(cè)定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡具有SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測(cè)定的高特異性和敏感性,現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白,并能對(duì)蛋白進(jìn)行定性和半定量分析。

Western blotting服務(wù)實(shí)驗(yàn)流程

u 細(xì)胞及組織蛋白質(zhì)抽提;

u 蛋白質(zhì)定量;

u 變性聚丙烯酰胺不連續(xù)凝膠電泳(SDS-PAGE);

u 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)膜;

u 膜的封閉;

u 一抗、二抗孵育;

u 結(jié)果檢測(cè):化學(xué)發(fā)光法檢測(cè),X 膠片曝光顯影;

u 數(shù)據(jù)分析;


代測(cè)說(shuō)明:

1、有趨勢(shì),不需做預(yù)實(shí)驗(yàn)。

2、沒(méi)有趨勢(shì),要求做預(yù)實(shí)驗(yàn)。

3、WB檢測(cè)里包含了蛋白提取。

4、實(shí)驗(yàn)結(jié)束,返還膠圖。

5、一個(gè)指標(biāo)只能跑一張膜


WB實(shí)驗(yàn)代測(cè)的優(yōu)勢(shì):

1、western免疫印跡是將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜上,然后利用抗體進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)已知表達(dá)蛋白,可用相應(yīng)抗體作為一抗進(jìn)行檢測(cè),對(duì)新基因的表達(dá)產(chǎn)物,可通過(guò)融合部分的抗體檢測(cè)。

2、與southern或northern雜交方法類(lèi)似,但western免疫印跡采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測(cè)物是蛋白質(zhì),“探針"是抗體,“顯色"用標(biāo)記的二抗。
3、經(jīng)過(guò)page分離的蛋白質(zhì)樣品,轉(zhuǎn)移到固相載體上,固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì),且能保持電泳分離的多肽類(lèi)型及其生物學(xué)活性不變。
4、以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,與對(duì)應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng),再與酶或同位素標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng),經(jīng)過(guò)底物顯色或放射自顯影以檢測(cè)電泳分離的特異性目的基因表達(dá)的蛋白成分。該技術(shù)也廣泛應(yīng)用于檢測(cè)蛋白水平的表達(dá)。







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